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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：白介素11受體α/IL-11Rα抗體 FAM131A蛋白抗體 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 人腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠表皮角化細(xì)胞 CTB-1人淋巴癌細(xì)胞 L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：455
更新時間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7680 |
細(xì)胞簡介：
人瘢痕疙瘩成纖維分離自皮膚瘢痕疙瘩組織；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織，目前學(xué)術(shù)界認(rèn)為各種原因?qū)е碌鸟：廴缇哂幸韵绿攸c，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍；②呈持續(xù)性生長；③高起皮膚表面、質(zhì)硬韌、顏色發(fā)紅的結(jié)節(jié)狀、條索狀或片狀腫塊。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞同正常皮膚成纖維細(xì)胞在形態(tài)上沒有表現(xiàn)出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞生長同正常皮膚成纖維細(xì)胞的生長沒有明顯的差別。癜痕成纖維細(xì)胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細(xì)胞。
方法簡介：
公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肌肝（Cr）試劑盒 組裝/原裝
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 96T/48T
小鼠活化素A(Activin-A)試劑盒 96T/48T
小鼠活化蛋白C(APC)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒
HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanadrenomedullin,ADM試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)
MouseactivatedproteinC,APCELISAKit小鼠活化蛋白C(APC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（CD106）重組兔單克隆抗體
IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 Protein
GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(抗原)
CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白
GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(抗原)
DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)
IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 Protein
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白
CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞大鼠硬脂酰去飽和酶(SCD)試劑盒 ，英文名： SCD ELISA Kit
Mouse ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒
MouseNeuroophin3,-3ELISAkit 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISAKit人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽
細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAPC大鼠活化蛋白C
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
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