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      大鼠血管動(dòng)蛋白(AMOT)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

      日期:2021-12-21瀏覽:1145次

      大鼠血管動(dòng)蛋白(AMOT)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:

      1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

      2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

      3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

      4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

      7.溫育:操作同 3。

      8.洗滌:操作同 5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

      10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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